DNA RESEARCH- JOURNALS
Cbfal é um fator de transcrição essencial para a formação óssea, mas seus transcritos também foram detectados no timo e testículos. Para elucidar a expressão de Cbfal em testículos, isolamos cDNA de Cbfal de camundongo
testículo. Primeiro, examinamos o comprimento dos transcritos expressos nos testículos de camundongos por hibridização Northern. Usando uma sonda de cDNA que pode detectar Cbfal Tipo I e Tipo II (Tipo I: originalmente relatado como Pebp2aA por Ogawa et al.1
; Tipo-II: originalmente relatado como til-1 por Stewart et al.2
), Transcrições de 1,8 kb foram detectado em testículos, e transcritos maiores (6,3 kb e 7,4 kb) em linhas de células T, timo e osso. Usando um
Sonda específica do tipo II (sonda específica da isoforma óssea), surpreendentemente, foram detectados transcritos de testículo de 1,8 kb
bem como aqueles (6,3 kb) encontrados no osso. Além disso, o local de início da transcrição no testículo do rato coincide com um dos três locais iniciais identificados no osso. Esses resultados sugerem que a transcrição do testículo é gerada do mesmo promotor de Cbfal Tipo II, que se pensa ser ativo apenas em osteoblastos e alguns condrócitos. Em seguida, para definir a diferença no comprimento dos transcritos, isolamos o cDNA Cbfal de camundongo
testículo. A análise de sequência do cDNA mostrou que splicing alternativo em torno do exon 2 e poliadenilação dentro do exon 8 ocorreu na isoforma testicular, que produz as transcrições menores. Esses dados revelaram que o mRNA de Cbfal do testículo é transcrito a partir do mesmo promotor usado nos ossos, mas a pós-transcrição a regulação é diferente entre testículos e tecidos esqueléticos.
http://dnaresearch.oxfordjournals.org/content/7/3/181.short
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